| 区間 | 通過地点 | 開設時間 | 閉鎖時間 | 特徴・見どころ | |
| 0km | スタート | 三鷹駅南口周辺 | 9:00（受付終了後任意スタート） | ||
| 井の頭恩賜公園 | ジブリの森美術館 | ||||
| 武蔵野の森公園 | 近藤勇生家跡・東京オリンピック自転車競技ロードレーススタート地点 | ||||
| 11.1km | CP1 | 府中・多摩川かぜのみち | |||
| 18.9km | CP2 | 大谷戸公園 | 多摩川サイクリングロード高速コースを経て多摩丘陵地域 | ||
| 多摩中央公園（パルテノン多摩） | よこやまの道・巨大なニュータウン | ||||
| 30.2km | CP3 | 町田街道 | |||
| 39.4km | CP4 | 館町交差点 | 多摩の里山台地～町田街道 | ||
| 権現平 | トレイル | ||||
| 草戸峠 | トレイル | ||||
| 44.4km | CP5 | 高尾山入口交差点 | 隈研吾設計の駅舎 | ||
| ひよどり山トンネル | |||||
| 道の駅滝山 | 都内唯一の道の駅 | ||||
| 57.1km | CP6 | 滝山城跡入口 | トレイル・滝山城跡 | ||
| 69.65km | CP7 | 羽村草花自然公園 | 羽村取水堰 | ||
| 77km | CP8 | 六道山公園入口 | トレイル | ||
| 多摩湖 | 多摩湖自転車道 | ||||
| 87.63km | CP9 | 武蔵大和駅西 | 多摩湖・ベルーナドーム | ||
| 保谷狭山自然公園自転車道 | 都内随一の直線区間 | ||||
| 100km | ゴール | 三鷹駅南口周辺 | 27日5:00予定 | 16:00 | ゴール！ |
※フリースタート/セルフチェック方式に伴い、CP開設・閉鎖時間等はありません。
※足きり時間は特に設定しませんが、ゴール閉鎖時間に間に合わないと思われる参加者には、適宜リタイア勧告いたします。
ポイント
- 比較的安全な河川沿い区間・歩道多め（山中はライト必須）
- 信号少なめで歩きやすいコース
- コンビニ、公衆トイレ多数
- 主要駅通過が多く、リタイア後も公共交通機関が利用しやすい設計